英雄联盟手游为玩家提供了一个不断拓展的英雄阵容，目前游戏中已有近百位各具特色的英雄可供选择，这些英雄传承自端游的经典，并根据移动端的特点进行了适配与优化。他们大致被划分为坦克、战士、刺客、法师、射手和辅助六大职业，并依照主流玩法分属上单、打野、中单、ADC及辅助五大分路，为玩家提供了丰富多样的战术组合与玩法体验。每一位英雄都拥有四个独特的技能，包括三个基础技能和一个终极技能，部分能切换形态的英雄则拥有更多的技能组合，确保了操作深度与策略多样性。
在上单位置，玩家可以选择侧重承受伤害与开团的坦克英雄，或是追求线上压制与单带的战士英雄，例如德玛西亚之力盖伦、无双剑姬菲奥娜、诺克萨斯之手德莱厄斯等都是其中的典型代表。打野位置则活跃着诸如盲僧李青、德邦总管赵信、皎月女神黛安娜等英雄，他们肩负着掌控野区资源、支援各路带动节奏的重任，其惩戒技能在消灭一定数量野怪后可升级为更具进攻性或功能性的形态。
中单往往是团队的魔法或物理伤害核心，这个位置的英雄通常拥有强大的爆发能力或持续的消耗手段。法师如九尾妖狐阿狸、暗黑元首辛德拉，以及刺客类英雄如影流之主劫、刀锋之影泰隆，都在中路演绎着对决的艺术。而下路的射手位，即ADC，是团队后期物理输出的保障，英勇投弹手库奇、皮城女警凯特琳、虚空之女卡莎等英雄，依靠普攻与技能的结合进行持续输出，非常考验玩家的走位与生存能力。
辅助英雄是ADC的伙伴也是团队的守护者，他们通常分为保护能力突出的软辅和先手控制强势的硬辅。弗雷尔卓德之心布隆能举起盾牌为队友抵挡伤害，魔法猫咪悠米可以附身队友提供治疗与增益，而魂锁典狱长锤石则以其多功能性的钩子和灯笼著称。辅助玩家需要精通视野控制、保护后排以及寻找开团时机，是团队中不可或缺的战略大脑。
选择一些技能机制直观、容错率较高的英雄有助于快速熟悉游戏。盖伦的技能简单直接，安妮的技能命中反馈明确，艾希则能提供宝贵的全局视野。玩家可以从这些英雄入手，逐步理解对线、团战等基本概念，再根据个人喜好尝试更多复杂或专精于某个位置的英雄。
玩家对游戏理解的深入，可以根据版本变迁和个人打法探索更多英雄。游戏版本更新会调整英雄的强度，某些英雄可能会在特定时期表现得尤为突出，但每位英雄在精通其技巧的玩家手中都能发挥关键作用。掌握不同英雄的克制关系、技能连招以及在团战中的定位，是提升水平、享受游戏深度乐趣的重要途径。
